作為一名IVD產品注冊專員，經常有企業(yè)朋友咨詢膠體金法試劑研發(fā)和注冊申報中的細節(jié)問題。其中一個常見疑問就是關于企業(yè)內部參考品濃度梯度的可視化表達方式，特別是能否使用比色卡，以及在申報資料中如何體現(xiàn)。這個問題看似簡單，但涉及到產品研發(fā)的嚴謹性和注冊資料的合規(guī)性，咱們今天就來好好聊聊。

企業(yè)內部控制參考品濃度梯度可以用比色卡表示嗎？

答案是可以的。膠體金法定性檢測試劑，主要是通過觀察檢測線（T線）和質控線（C線）的顯色情況（有無、深淺）來判斷樣本中目標物（如病原體抗原/抗體、特定蛋白標志物）的存在與否。企業(yè)在研發(fā)過程中，為了評估試劑性能的穩(wěn)定性、批間一致性以及確定臨界值（Cut-off值），通常會配制包含不同濃度目標物的內部參考品，形成一個濃度梯度系列。

1.這個濃度梯度系列的目標，是模擬實際樣本中目標物從“檢測不到”到“低濃度”（臨界值附近）再到“中/高濃度”的變化過程。傳統(tǒng)的做法可能是在研發(fā)記錄中詳細記錄每個參考品對應的具體濃度數(shù)值。然而，在實驗室實際操作和日常質控中，研發(fā)人員和技術人員也需要一個直觀、快速的判讀依據。

2.這時候， 比色卡（或稱為色階卡）就派上用場了。企業(yè)可以將配制好的不同濃度的內部參考品滴加到試劑條上，待反應完成后，將顯色結果（主要是T線的顏色深淺）排列、拍照或掃描，制作成一張標準的比色卡圖片。這張比色卡上的每一個色階，就對應著參考品濃度梯度中的一個特定濃度點，或者代表一個特定的顯色強度范圍。網上很多討論試劑研發(fā)流程的分享，也提到過類似做法，作為輔助研發(fā)人員直觀判斷顯色均一性和梯度效果的工具。

3.使用比色卡的好處是直觀、便捷，便于研發(fā)人員在優(yōu)化工藝、調試配方時快速比對不同批次或不同條件下的顯色差異，也方便生產或質檢人員在日常質控中快速判斷試劑條的顯色是否符合預期梯度。國家藥監(jiān)局醫(yī)療器械技術審評中心（器審中心）在相關答疑中也指出，這種基于色階的判讀方式，有助于反映樣本在特定濃度下的顯色均一性。

所以，總結這第一點：企業(yè)完全可以根據自身研發(fā)和質控流程的實際需要，自行決定是否為內部參考品濃度梯度制作并使用比色卡。法規(guī)沒有強制要求必須使用，但也沒有禁止，這屬于企業(yè)內部控制策略的一部分。

如果用了比色卡，申報資料里需要寫進去嗎？怎么寫？

如果企業(yè)在研發(fā)和質控過程中確實設置并使用了比色卡來輔助表示內部參考品濃度梯度，那么在提交注冊申報資料時，必須在相關部分進行體現(xiàn)。關鍵點在于“研究資料”中的“參考品”部分。

1.參考品制備過程的詳細描述：在申報資料的“研究資料”章節(jié)中，詳細說明企業(yè)內部參考品的來源（如重組蛋白、臨床樣本陽性池等）、配制方法（如稀釋基質、稀釋倍數(shù)）、定值過程（如何確定每個梯度點的濃度值）以及最終確定的濃度梯度范圍。這部分描述是基礎，無論是否使用比色卡都需要提供。

2.明確說明比色卡的設置和應用：如果企業(yè)使用了比色卡，那么在上述參考品制備描述的基礎上，必須額外清晰地寫明：

（1）比色卡是如何制作的：是基于哪一批次或哪個特定條件下配制的參考品制作的？使用了什么方法（如拍照、掃描）？是否進行了標準化處理（如白平衡校正）？

（2）比色卡與濃度梯度的對應關系：比色卡上的每一個色階具體對應參考品濃度梯度中的哪個濃度點或哪個濃度范圍？這種對應關系是如何建立和驗證的？例如，可以說明“色階1對應濃度為X ng/mL的參考品顯色結果，色階2對應濃度為Y ng/mL...”。

（3）比色卡在研發(fā)和性能評估中的作用：簡要說明比色卡在哪些環(huán)節(jié)被使用，比如在檢出限確定時用于判斷臨界顯色水平，在精密度研究中用于評估不同批次/不同操作者判讀顯色一致性的工具等。器審中心明確建議，在分析性能評估（如檢出限、精密度、特異性）中提交利用內部色卡（比色卡）進行研究的結果，因為它能提供關于顯色均一性的重要信息。

簡單說，在申報資料的“參考品制備”相關內容里，不能只說“我們做了個比色卡”，而是要把參考品是怎么配出來的，以及這個比色卡具體是怎么做出來的、怎么用的、代表什么意義，都原原本本、清清楚楚地寫明白。這樣審評老師才能理解企業(yè)質量控制的手段和依據，評估其科學性和可靠性。

總結一下

關于膠體金法定性檢測試劑企業(yè)內部參考品濃度梯度是否能用比色卡表示以及在注冊資料中如何體現(xiàn)，核心要點就兩條：

1.企業(yè)可自行確定是否設置比色卡。用不用，企業(yè)自己根據內部管理需求定。

2.如果企業(yè)設置了比色卡，研究資料中需寫明企業(yè)參考品配制過程及比色卡是如何設置的。只要用了，在申報資料的研究部分，就必須把參考品怎么配的、比色卡怎么做怎么用的，詳細描述清楚。

理解并落實好這兩點，企業(yè)在進行膠體金試劑研發(fā)和注冊申報時，在參考品濃度梯度管理和相關申報資料準備上，就能做到既符合法規(guī)要求，又能有效支持產品的性能宣稱。希望這篇文章能幫您理清思路。